AnnexinV-FIYS/PI细胞凋亡检测试剂盒

AnnexinV-FIYS/PI细胞凋亡检测试剂盒基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。

 AnnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰

（Phosphatidylserine，PS）高亲和力特异性结合。以标记了FITC的 AnnexinV作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜

可检测细胞凋亡的发生。

Propidium iodide（PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期和死细胞由于细胞膜破裂，因此PI能够将

细胞核染红。将AnnexinV与PI联合使用，可以区分活细胞（FITC/PI均为阴性）、凋亡早期 细胞(FITC阳性、PI均为阴性)、

凋亡晚期或死细胞(FITC/PI均为阳性)。

本细胞凋亡检测试剂盒使用改进型的高纯度FITC染料，其在红色通道（690nm）无发射光，因此极大的减少了对红色通道的

干扰。使用该试剂盒进行细胞凋亡检测时荧光相互干扰更小、检测更准确。

组分

组分名称数量（20T/100T）

Annexin V-FITC100 μl/500 μl

PI Staining Solution100 μl/500 μl

10×Annexin V Binding Buffer20 ml

应用

细胞凋亡检测

储存

2～8℃，有效期1年。

注意事项

1. 整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作。

2. 反应完毕后请尽快检测，反应1 小时后荧光强度就开始衰变。

3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质，在操作时请注意避光。

4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。

5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水（1:9）稀释至 1×备用。

AnnexinV-FIYS/PI细胞凋亡检测试剂盒恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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