蔗糖磷酸化酶试剂

蔗糖磷酸化酶试剂（Sucrose Phosphorylase）属于糖基水解酶13家族，是一种催化转移葡萄糖苷键的酶，能够催化蔗糖和无机磷酸

盐合成1-磷酸-葡萄糖。该酶主要以蔗糖、1-磷酸-葡萄糖为供体，多类物质如多羟基的糖和糖醇、酚羟基、羧基等为受体，

催化合成各种糖苷。该蔗糖磷酸化酶通过重组制备而得，其催化蔗糖（sucrose）的磷酸化反应，生成

D-fructose和α-D-glucose-1-phosphate，反应式为： Sucrose+Pi=α-D-glucose-1-phosphate+D-fructose。

 该蔗糖磷酸化酶的比活>100U/mg，该酶通过改造可耐热，反应温度可在30~65℃进行，最佳反应温度为55℃。在60℃孵育

60h后活性损失<30%。

组分

组分名称数量

Sucrose Phosphorylase (0.5 U/μl)500 μl

活性定义

1单位指在37°C，pH 7.6条件下，每分钟由蔗糖催化生成1.0 μmole的D-fructose所需的酶量。反应缓冲液为100mM KH2PO4，200mM Sucrose，pH7.6。

储存

-20℃可保存2年。

蔗糖磷酸化酶试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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