牛痘病毒-拓扑异构酶试剂

牛痘病毒-拓扑异构酶试剂该Vaccinia Virus Topoisomerase I 来源于牛痘病毒，通过基因重组方案制备纯化。该TOPO酶能解旋DNA的超螺旋结构，

此外还能识别并切割双链DNA末端 [5’C(T)CCTT]，并且与DNA形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA的5’

-OH基团后，重新连接形成完整DNA链。因此，该TOPO 酶可作为DNA连接的有效工具酶，用于DNA的载体连接

（TOPO克隆载体制备）、接头连接（NGS建库）等实验。

组分

组分名称数量

Vaccinia TOPO (5pmol/μl)100 μl

10×TOPO Buffer1 ml

2M NaCl1 ml

应用

DNA-载体连接（TOPO载体制备）

接头连接（NGS建库）

储存

-20℃可保存3年。

牛痘病毒-拓扑异构酶试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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