详细介绍
热稳定单链结合蛋白试剂热稳定单链DNA 结合蛋白,是从极度耐热的微生物中分离得到的单链DNA结合蛋白质,在95°C温育60分钟后,
依然具有全部活性。因为具有的热稳定性,ET SSB可用于需要高温反应条件的实验中,如提高DNA聚合酶的延伸能力、
稳定和标记ssDNA结构、增加PCR反应的产量和特异性、增加RT-PCR中反转录的产量和延伸能力、改善强二级结构区域的DNA
测序。
组分
组分名称200 μg
ET SSB Protein (1 μg/μl)200 μl
应用
提高 DNA 聚合酶的延伸能力
稳定和标记 ssDNA 结构
增加 PCR 反应的产量和特异性
改善强二级结构区域的 DNA 测序
储存
-20℃可保存3年。
使用注意事项
(1) 该蛋白分子量为35kD。
(2) 该蛋白保存液含50%甘油。
(3) 通常50μl PCR的反应体系中可加入200ng。
热稳定单链结合蛋白试剂试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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