虾碱性磷酸酶（SAP）试剂

虾碱性磷酸酶（SAP）试剂（Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)催化DNA和RNA 的5’和3’磷酸单脂的去磷酸化反应，也可水解核糖和

脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。虾碱性磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛，如去除DNA和RNA 末端的磷酸基团，

用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，可使线性载体去磷酸化，防止自连。虾碱性磷酸酶在65°C温育5分钟即可的、

不可逆的失活，因此，在连接或末端标记之后，可以不用去除热敏磷酸酶。基于以上特性，该酶是传统去磷酸化酶--小牛肠碱性

磷酸酶（CIP）的替代物。

组分

组分名称500U

rSAP (2 U/μl)250 μl

10×SAP Buffer1 ml

应用

DNA 和 RNA 的去磷酸化

防止克隆载体的自连

制备5´末端标记模板

活性定义

1单位指在37°C条件下，每分钟水解1umol的pNPP（p-Nitrophenyl Phosphate）到pNP所需要的酶量。

储存

-20℃可保存2年。

虾碱性磷酸酶（SAP）试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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