详细介绍
E.coli MutL protein试剂DNA错配修复系统(MMR)主要由三种蛋白组成,包括MutS、MutL和MutH。其中MutS负责识别错配或未结合位点并与
之结合,随后MutL蛋白与MutS-DNA形成复合体,增强其稳定性,并激活MutH的内切酶活性,协同解旋酶和单链结合蛋白将
错配序列切除。E.coli MutL蛋白具有依赖于DNA的ATPase 活性,在DNA错配修复中能够介导MutS和UvrD发挥作用,
因此其在错配修复中发挥重要作用。
组分
组分名称50 μg
E.coli MutL Protein (0.5 μg/μl)100 μl
储存
-20℃可保存3年。
Storage Buffer
20mM Tris-HCl,pH7.5
200mM NaCl
5mM DTT
25%甘油
E.coli MutL protein试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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