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2024-11-01详细介绍
Tth MutS Protein试剂DNA错配修复系统(MMR)主要由三种蛋白组成,包括MutS、MutL和MutH。其中MutS负责识别错配或未结合位点并与
之结合,随后MutL蛋白与MutS-DNA形成复合体,增强其稳定性,并激活MutH的内切酶活性,协同解旋酶和单链结合蛋白将
错配序列切除。 ttMutS蛋白是一种分离自嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)的DNA错配修复蛋白,
在最适温度 65-75℃ 范围内,该蛋白具有依赖于DNA的ATPase 活性。 ttMutS蛋白在DNA复制中识别错配碱基和插入碱基形成
的Loop结构,其紧密结合Loop结构从而阻止聚合酶的延伸。因此,其可用于错配PCR反应(ARMS-PCR)和基因芯片中,
除此外,在基因合成中能阻止错配的产生,降低基因突变率。
组分
组分名称50 μg
Tth MutS Protein (1 μg/μl)50 μl
储存
-20℃可保存3年。
Storage Buffer
20mM Tris-HCl,pH7.5
200mM NaCl
5mM DTT
25%甘油
Tth MutS Protein试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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