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2024-11-01详细介绍
T7 SSB单链结合蛋白试剂(T7 single strand binding protein)来源于T7噬菌体基因2.5,又名T7 gp2.5, 参与T7噬菌体DNA的
复制和重组修复。该蛋白可与单链DNA模板结合,与T7 DNA 聚合酶和解旋酶/引发酶相互作用,可通过滚环扩增的方式获得长
达40kb的DNA。该制品是通过基因工程方式重组表达纯化而得。
组分
组分名称600 μg
T7 SSB Protein (3 μg/μl)200 μl
应用
提高 DNA 聚合酶的延伸能力
稳定和标记 ssDNA 结构
增加 PCR 反应的产量和特异性
增加 RT-PCR 中,反转录的产量和延伸能力
改善强二级结构区域的 DNA 测序
储存
-20℃可保存3年。
蛋白保存液
20mM Tris-HCl,pH7.5
200mM NaCl
5mM DTT
25%甘油
T7 SSB单链结合蛋白试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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