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2024-11-01详细介绍
T7 gp4A protein试剂T4 噬菌体复制分为依赖于起始子的起始复制和依赖于重组酶的复制。由起始复制产生的3'-ssDNA作为重组复制的第一步链侵入
的组份, 该3'-ssDNA被T4 gp32 蛋白所覆盖,同时将T4 UvsY募集到此;T4 UvsY作为T4 UvsX的loader将其运载至此,
于此同时gp32被置换下来, UvsX和UvsY形成突触结构, 然后侵入同源的双链形成D-Loop, 一旦形成D-Loop,
UvsX即被置换下来。D-loop被置换链作为滞后链合成的模板,很快被gp32结合。随后, 解旋酶loader gp59与gp32覆盖的
DNA复制叉结合,将gp41/61运载至此, gp61蛋白合成寡核苷酸片段促进滞后链DNA的合成,而gp41通过解旋模板而促进先
导链的DNA合成。最后,聚合酶的滑板蛋白T4 gp45蛋白和其loder蛋白 gp44/62与先导链相结合,促进聚合酶gp43的组装,
T4 gp45蛋白将gp43运载至复制叉处后启动先导链和滞后链的合成,gp44/62随后从复制叉处解离。因此,
gp59作为解旋酶gp41的loader在gp41引导的DNA先导链合成中起到重要作用。
组分
组分名称100 μg
T4 gp59 Loader Protein (1 μg/μl)100 μl
储存
-20℃可保存3年。
T7 gp4A protein试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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