T4 GP61 Primase试剂

T4 GP61 Primase试剂T4 噬菌体复制分为依赖于起始子的起始复制和依赖于重组酶的复制。由起始复制产生的3'-ssDNA作为重组复制的第一步链侵入

的组份， 该3'-ssDNA被T4 gp32 蛋白所覆盖，同时将T4 UvsY募集到此；T4 UvsY作为T4 UvsX的loader将其运载至此，

于此同时gp32被置换下来， UvsX和UvsY形成突触结构， 然后侵入同源的双链形成D-Loop， 一旦形成D-Loop，

UvsX即被置换下来。D-loop被置换链作为滞后链合成的模板，很快被gp32结合。随后， 解旋酶loader gp59与gp32覆盖的

DNA复制叉结合，将gp41/61运载至此， gp61蛋白合成寡核苷酸片段促进滞后链DNA的合成，而gp41通过解旋模板而促进先

导链的DNA合成。最后，聚合酶的滑板蛋白T4 gp45蛋白和其loder蛋白 gp44/62与先导链相结合，促进聚合酶gp43的组装，

T4 gp45蛋白将gp43运载至复制叉处后启动先导链和滞后链的合成，gp44/62随后从复制叉处解离。因此，

gp59作为解旋酶gp41的loader在gp41引导的DNA先导链合成中起到重要作用。

组分

组分名称100 μg

T4 gp59 Loader Protein (1 μg/μl)100 μl

储存

-20℃可保存3年。

T4 GP61 Primase试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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