HS Nucleoside diphosphokinase（NDK）试剂

HS Nucleoside diphosphokinase（NDK）试剂热稳定核苷二磷酸激酶是一种分离自嗜热栖

热菌Thermus thermophilus的NDPK(Nucleoside diphosphate kinase)同源蛋白, 该酶不仅催化腺苷三磷酸（ATP）

和核苷二磷酸（NDP）之间高能磷酸基团的转移，还具有NDP激酶活性和蛋白磷酸转移酶活性，并参与转录调控和信号转导。

在最适温度 60-75℃范围内，其在体内负责合成除ATP以外的其它核糖核苷酸的生成，由二核糖核苷酸生成三核糖核苷酸：

(d)XDP+(d)YTP ?(d)XTP+(d)YDP。

组分

组分名称数量

HS Nucleoside diphosphokinase

(10 U/μl)50 μl

10xNDPK Buffer1 ml

活性定义

每单位指37度条件下，在ATP存在条件下每分钟转化1.0 μmole TDP到TTP所需酶量。该酶比活为1X10e5 U/mg，

制品浓度约100 ng/μl。

储存

-20℃可保存3年。

HS Nucleoside diphosphokinase（NDK）试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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