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2024-11-01详细介绍
ThermoStable FEN1试剂试剂热稳定Flap核酸内切酶1催化切除分叉双链DNA底物中的5'Flap结构,产生5'磷酸末端。FEN1消化产物可以经DNA连接酶而形成双链DNA。在体内,FEN1是冈崎片段加工成熟的基本元件,并参与调控碱基切除修复过程。
单位定义
1单位指在20ul反应体系中,65℃的条件下,10分钟切1pmol含5'flap结构的寡核苷酸底物所需要的酶量。
热失活
否
储存
置于-20°C可保存2年,避免反复冻融。
ThermoStable FEN1试剂试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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