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2024-11-01详细介绍
无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶是一种核酸内切酶,可将核酸降解成2~5个碱基的5‘单磷酸核苷酸,因其能高效降解任何形
(双链,单链,线状,环状)的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性,又被称为“全能核酸酶"。Benzonase核酸酶能有效降低
蛋白样品粘度,去除蛋白样品中核酸的污染,且无蛋白酶活性残留,核酸酶活性达1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶
在降低粘性的同时, 也具有多种其他用途,如:减少了样品处理时间,增加了蛋白产量,离心时时沉淀和上清分离的更,
更便于溶液的离心(尤其是超滤);提高色谱纯化的效率等。
本公司Benzonase核酸酶包括四种,分别为不含任何标签的Benzonase核酸酶(科研级别)、无内毒素Benzonase核酸酶、
Strep tagII Benzonase核酸酶(科研级别)和无内毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶,可适应不同下游用途的需求。
其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通过Strep Tactin XT Resin高效去除,而无内毒素的两种Benzonase
核酸酶,内毒素含量<40EU/mL(按照单位换算量计算为,每1000U中含有的内毒素<0.15EU),
可适用于药用级别的研发和生产。另外,核酸酶残留可通过我公司开发的基于 荧光探针的Benzonase核酸酶残留检测试剂盒
进行评测,15min即可完成检测,可检测到2ng/ml的核酸酶残留。
用量推荐
实验类型电泳蛋白样品制备非药物蛋白生产药物蛋白生产疫苗、病毒生产细胞药物
推荐产品Benzonase(科研级)Benzonase(科研级)
Strep-tagII Benzonase(科研级)Benzonase(无内毒素级)
Strep-tagII Benzonase(无内毒素级)
细胞数量1X106个细胞(10mg组织)1g湿重 (重悬液10mL)1L 发酵上清液1L 培养物
用量125U (0.5 µL)25U/mL(1 µL)25U/mL(1 µL)0.1U/mL(0.4 µL)0.1U/mL(0.4 µL)
推荐用量500U (2 µL)250U/mL(10 µL)250U/mL(10 µL)25U/mL(100 µL)5U/mL(20 µL)
作用时间通常作用时间37℃在15~60min;25℃在30~120min;
单位定义
37℃,pH 8.0反应条件下,在30分钟内使△A260 值降低1.0(相当于消化37 μg DNA )的酶量定义为一个活性单位。
注意:含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品,对该酶活性有部分抑制作用,使用时需要增加酶的用量。
应用
蛋白提取时去除核酸污染:在重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时,Benzonase核酸酶可有效降低样品粘度,利于下游操作
与细胞或细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白质产量
减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象
降解核酸,利于不可溶性蛋白复性前高质量包涵体制备
有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响,改善蛋白质的分离效果,增强2-DE分辨率
疫苗和病毒样品制备中DNA污染的去除
储存
置于-20°C,可保存2年。
无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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