Exonuclease VII试剂

Exonuclease VII试剂来源于大肠杆菌，从 5' -3' 和 3'-5'方向切割单链 DNA，对线性或环状双链 DNA 没有活性。

当 PCR 完成时，可以使用核酸外切酶 VII 去除寡核苷酸引物，然后再使用不同的引物进行下一步 PCR

。核酸外切酶 VII 消化单链 DNA 时，无需金属离子。 本产品是通过重组表达核酸外切酶 VII 基因（XseA 和 XseB）

而得高纯度蛋白。

组分

名称数量

Exonuclease VII (10 U/μl)25 μl/250 μl

10X Exonuclease VII Buffer1 ml/1 mlx5

单位定义

在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30分 钟内能催化产生 1 nmol 酸溶性核苷酸所需的酶量定义 为一个活性单位。

应用

PCR后去除多余引物

PCR后去除硫代磷酸化寡核苷酸引物

去除双链DNA中的单链DNA

1X Exonuclease VII Buffer

50 mM Tris-HCl (pH 8), 50 mM Na3PO4, 8 mM EDTA , 10 mM 2-mercaptoethanol。

热失活

95℃ 10min

酶保存液

50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 0.1M NaCl, 1 mM DTT, 50% Glycerol.

储存

置于-20°C，可保存2年。

Exonuclease VII试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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