Exonuclease T （核酸外切酶T）试剂

Exonuclease T （核酸外切酶T）试剂又称为 RNase T，是一种单链 RNA 或 DNA 特异性核酸酶，该核酸外切酶T需要游离的 3´ 末端，

以 3´-5´ 方向去除核苷酸。核酸外切酶T可用于将含有 3´ 突出末端的 RNA 或 DNA 生成平末端。

本产品是通过重组表达Exonuclease T 基因而得的高纯度蛋白，无核酸内切酶和其他外切酶的污染。

组分

名称数量

Exonuclease T (5 U/μl)50 μl/500 μl

10X Exonuclease T Buffer1 ml/1 mlx5

单位定义

在 100 μl 反应体系中，25℃ 条件下，30 分钟内能从1 nmol [3H]-标记的聚胸腺嘧啶核苷催化产生 0.1 nmol 的可溶于TCA的 

DNA 所需要的酶量定义为一个活性单位。

1X Exonuclease T Buffer

50mM KAc，20mM Tris-Ac，10mM Mg(Ac)2，1mM DTT（pH 7.9）

酶保存液

10 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, 200 μg/ml BSA, pH 7.5。

储存

置于-20°C，可保存3年。

使用注意事项

核酸外切酶T对RNA 和DNA 具有不同的活性。对于 RNA，在标准反应条件下，通过凝胶电泳检测，1单位核酸外切酶T可以消化 1.0 pmol的rA20。

Exonuclease T （核酸外切酶T）试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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