Rnase A(20mg/ml)试剂

Rnase A(20mg/ml)试剂，不含DNase及蛋白酶，是一种核糖核酸内切酶，可特异性降解单链RNA的C及U残基部位。它可以剪切核苷酸5'-核糖与相邻的嘧核苷酸3'-核糖上所连磷酸基团间的磷酸二酯键，获得的2', 3'-环状磷酸盐可进一步水解为相应的3'-核苷磷酸。该酶的浓度为20mg/ml，活力约1500U/ml。

单位定义

一个单位定义为在25°C、pH 5.0的条件下，催化水解RNA的一级反应速度常数为1.0时的RNase A量。

储存

置于-20°C，可保存3年。该酶室温也极其稳定。

使用注意事项

（1） 该酶对温度不敏感，但最佳反应温度为37°C。

（2） 该酶可在含有SDS的条件下发挥活性。

（3） 通常去除基因组DNA中的RNA污染的使用比例为1:200~1000。

（4） 使用前无需再加热处理。

Rnase A(20mg/ml)试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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