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T7核酸外切酶试剂

简要描述:T7核酸外切酶试剂,上海雅吉生物科技有限公司登录正版是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒

  • 产品型号:C5021
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-11-01
  • 访  问  量:153

详细介绍

T7核酸外切酶试剂作用于双链DNA,沿5'→3'方向催化去除5'单核苷酸,它既能从5'末端起始消化,也能从双链 DNA的切刻或缺口

处起始消化。它既能降解5'磷酸化 DNA 也能降解5'去磷酸化DNA。据报道,它能沿5'→3'方向降解RNA/DNA杂交双链上的

RNA或DNA,但不能降解双链或单链RNA。

组分

名称数量

T7 Exonuclease (10 U/μl)100 μl/1 ml

10×T7 Exo Buffer1 ml/1 ml×5

单位定义

1 单位指在50μl反应体系中,25℃条件下,30 分钟内能从双链DNA底物上催化产生1 nmol的酸溶性脱氧核糖核苷酸所需要

的酶量。

储存

置于-20°C,可保存3年。

使用注意事项

1. 1×T7 Exo Buffer:50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃),25℃温育。

2. 该酶的最佳反应温度为25°C,75°C 20min可失活。


T7核酸外切酶试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。

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应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

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应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)


以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前,下图为 65 度反应 30min 后。

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