Lambda核酸外切酶试剂

Lambda核酸外切酶试剂作用于双链DNA，沿 5´→3´方向逐步切去5´单核苷酸。最适底物是5´磷酸化的双链 DNA，

也能缓慢降解单链DNA和非磷酸化底物。该酶不能从DNA 的切刻或缺口处起始消化。

组分

名称数量

Lambda Exonuclease (5 U/μl)200 μl/1 ml

10×Lambda Exo Buffer1 ml/1 ml×5

单位定义

1单位指在50μl反应体系中，37℃条件下，30分钟内能从双链DNA底物上催化产生10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。

储存

置于-20°C，可保存3年。

使用注意事项

1. 1×Lambda Exo Buffer：67 mM Glycine-KOH（pH 9.4 @ 25℃），2.5 mM MgCl2，50μg/ml BSA，37℃温育。

2. 该酶的最佳反应温度为37°C，75°C 10min可失活。

3. 5´-0H端的切割速度比5´-PO4端慢20倍。单链DNA 比双链DNA慢100倍。

50℃，5min。

Lambda核酸外切酶试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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