SUMO 蛋白酶切对照融合蛋白试剂

SUMO 蛋白酶切对照融合蛋白试剂也称为UIP蛋白酶，是一种具有较高活性的半胱氨蛋白酶，来源于酵母编码的MIP1基因，其特异性识别UBL蛋白的三级结构－SUMO（Small Ubiquitin-Like Modifier）。SUMO蛋白酶能够识别完整的SUMO序列，并依赖正确的蛋白质构象，仅有完整的序列，没有正确的结构，SUMO酶是不能对目标蛋白进行切割的。因此，该酶是目前切割特异性最的蛋白酶，可在较广泛的作用温度和PH范围（pH7-9）内发挥作用，切割的最佳温度为30°C。SUMO蛋白酶的识别序列如下，切割位点位于QIGG之后 SDSEVNQEAKPEVKPEVKPETHINLKVSDGSSEIFFKIKKTTPLRRLMEAFAKRQGKEMDSLRFLYDGIRIQADQTPEDLDMEDNDIIEAHREQIGG

本公司生产的SUMO蛋白酶含有双His标签，酶切后，可通过Ni-NTA Resin亲和纯化，很容易地将SUMO去除；双His标签保证了，SUMO蛋白酶高亲和力的结合Ni-NTA，以最大限度的去除SUMO蛋白酶。该SUMO蛋白酶分子量约26kD。

组分

组分名称数量

SUMO 蛋白酶(10 U/μl)100 μl

10XSUMO Buffer1 ml

单位定义

在1XSUMO Protease Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.2% Igepal, 1 mM DTT)中，30°C反应1h，剪切>85％的100pmol底物，所需要的酶量定义为一个活性单位。

储存

SUMO蛋白酶置于-20°C可保存2年。

SUMO 蛋白酶切对照融合蛋白试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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