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2024-11-01详细介绍
Western一抗二抗通用稀释液试剂稀释液用于做Western blot实验时一抗或者二抗的稀释,稀释液中添加了多种抗体保护剂,可以增加抗体的活性和稳定性,减少抗体的非特异性结合,降低非特异性的背景着色,提高试验的特异性和灵敏度。用本稀释液稀释的一抗或者二抗使用后,可放在4℃或者-20℃保存,并且可以反复多次使用,节约您宝贵的抗体。按照每个一抗稀释10ml计算,该Western一抗稀释液可以稀释10个或10次Western Blot杂交实验。该制品中不含有抑制荧光显色或HRP显色的成分。
储存
-20℃可保存3年。开始使用后请于4℃保存,有效期为1年。
使用方法
1. 进行一抗孵育杂交 参考所用的一抗说明书,以及样品中目的蛋白的含量,使用本抗体稀释液按照适当比例稀释一抗,如1:1000、1:500等,一抗稀释后即可直接用于Western blot实验(室温孵育杂交1h或4℃杂交过夜)。实验结束后,可以回收稀释的一抗,4℃或-20℃ 保存,以用于下次的Western blot实验。
2. 进行二抗孵育杂交 进行完一抗孵育后,TSBT溶液洗涤膜1~2次,同样参考二抗说明书,使用本抗体稀释液,进行二抗的稀释,并进行二抗的孵育杂交(通常二抗杂交时间为室温30min即可)。杂交完毕后TBST洗涤膜3~4次,并进行下游显色。
Western一抗二抗通用稀释液试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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