Benzonase 核酸酶试剂

Benzonase 核酸酶试剂，是一种核酸内切酶，可将核酸降解成2~5个碱基的5‘单磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式

（双链，单链，线状，环状）的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性，又被称为“全能核酸酶"。Benzonase核酸酶能有效降

低蛋白样品粘度，去除蛋白样品中核酸的污染，且无蛋白酶活性残留，核酸酶活性达1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在

降低粘性的同时， 也具有多种其他用途，如：减少了样品处理时间，增加了蛋白产量，离心时时沉淀和上清分离的更，

更便于溶液的离心（尤其是超滤）；提高色谱纯化的效率等。

本公司Benzonase核酸酶包括四种，分别为不含任何标签的Benzonase核酸酶（科研级别）、无内毒素Benzonase核酸酶、

Strep tagII Benzonase核酸酶（科研级别）和无内毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶，可适应不同下游用途的需求。

其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通过Strep Tactin XT Resin高效去除，

而无内毒素的两种Benzonase核酸酶，内毒素含量<40EU/mL（按照单位换算量计算为，每1000U中含有的内毒素<0.15EU）

，可适用于药用级别的研发和生产。另外，核酸酶残留可通过我公司开发的基于 荧光探针的Benzonase核酸酶残留检测试剂盒

进行评测，15min即可完成检测，低可检测到2ng/ml的核酸酶残留。

用量推荐

实验类型电泳蛋白样品制备非药物蛋白生产药物蛋白生产疫苗、病毒生产细胞药物

推荐产品Benzonase(科研级)Benzonase(科研级)

Strep-tagII Benzonase(科研级)Benzonase(无内毒素级)

Strep-tagII Benzonase(无内毒素级)

细胞数量1X106个细胞(10mg组织)1g湿重 （重悬液10mL）1L 发酵上清液1L 培养物

低用量125U (0.5 µL)25U/mL(1 µL)25U/mL(1 µL)0.1U/mL(0.4 µL)0.1U/mL(0.4 µL)

推荐用量500U (2 µL)250U/mL(10 µL)250U/mL(10 µL)25U/mL(100 µL)5U/mL(20 µL)

作用时间通常作用时间37℃在15~60min；25℃在30~120min；

单位定义

37℃，pH 8.0反应条件下，在30分钟内使△A260 值降低1.0(相当于消化37 μg DNA )的酶量定义为一个活性单位。

注意：含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加酶的用量。

应用

蛋白提取时去除核酸污染：在重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时，Benzonase核酸酶可有效降低样品粘度，利于下游操作

与细胞或细菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白质产量

减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象

降解核酸，利于不可溶性蛋白复性前高质量包涵体制备

有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响，改善蛋白质的分离效果，增强2-DE分辨率

疫苗和病毒样品制备中DNA污染的去除

储存

置于-20°C，可保存2年。

Benzonase 核酸酶试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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