蛋白酶抑制剂混合物A（100X）试剂

蛋白酶抑制剂混合物A（100X）试剂货号产品名称组分数量保存温度用途

S0143蛋白酶及磷酸酶抑制剂混合物ABC（100X）蛋白酶抑制剂混合物A（100X）100 μl用于非磷酸及磷酸化蛋白的研究

磷酸酶抑制剂混合物B（100X）100 μl

磷酸酶抑制剂混合物C（100X）100 μl

蛋白酶及磷酸酶抑制剂组分及抑制性能

 蛋白酶抑制剂混合物A磷酸酶抑制剂混合物B磷酸酶抑制剂混合物C

组 分104mM AEBSF

80μM Aprotinin

5mM Bestatin

1.5mM E-64

2mM Leupeptin

1.5mM Pepstatin A100mM Sodium Fluoride

100mM Sodium Orthovanadate

400mM Sodium Tartrate

115mM Sodium Molybdate

200mM Imidazole2.5mM (-)-p-Bromotetramisole oxalate

500μM Cantharidin

500nM Microcystin LR, Microcystis aeruginosa

抑制蛋白酶种类Serine

Aminopeptidases Cysteine

Aspartic proteasesAcid phosphatases

Alkaline phosphatases

PTPs, ATPases,

Acid phosphatases

Acid and phosphoprotein

Alkaline phosphatasesAlkaline phosphatases

Ser/Thr phosphatases

PP1 and PP2A

根据试验情况推荐选择组合

试 验 类 型组合类型选择

Western Blot杂交，非磷酸化蛋白C2501＋S0142

Western Blot杂交，非磷酸化及磷酸化蛋白C2501＋S0143

Co-IP/IP试验，非磷酸化蛋白C1901＋S0142

Co-IP/IP试验，非磷酸化及磷酸化蛋白C1901＋S0143

单独分离细胞核蛋白和胞浆蛋白C2601＋S0143

使用方法

A: 非磷酸化蛋白的提取：在使用前数分钟内向WB Super RIPA裂解液中，加入蛋白酶抑制剂混合物A (S0142)，使其最终浓度为1×。如250μl WB Super RIPA裂解液，加入2.5μl蛋白酶抑制剂混合物A，混合均匀，进行后续样品裂解和蛋白提取。

B: 磷酸化蛋白的提取：在使用前数分钟内向WB Super RIPA裂解液中，加入蛋白酶抑制剂混合物A 、磷酸酶抑制剂混合物B 、磷酸酶抑制剂混合物C (S0143)各2.5μl，使其最终浓度为1×。如250μl WB Super RIPA裂解液，加入2.5μl蛋白酶抑制剂混合物A、2.5μl磷酸酶抑制剂混合物B 、2.5μl磷酸酶抑制剂混合物C，混合均匀，进行后续样品裂解和蛋白提取。

蛋白酶抑制剂混合物A（100X）试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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