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2024-11-01详细介绍
BCA Protein Assay Kit试剂是根据目前常用的蛋白浓度检测方法之一-BCA(bicinchoninic acid)
法改良研制而成,该试剂盒具有蛋白浓度测定的简单性,高稳定性,高灵敏度和高兼容性。本试剂盒的原理是蛋白质分子中
的肽键结构在碱性环境下能与Cu2+络合生成络合物,将 Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合,
形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大光吸收值,该复合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小
来测定蛋白的含量,1小时内即可完成蛋白定量检测。BCA蛋白定量试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准溶液
,测定范围为25~2000 μg/ml。该试剂盒可用于50次试管检测或500次ELISA板检测。
组分
组分名称数量保存
BCA Reagent A100 ml室温
BCA Reagent B1 ml× 2室温
BSA 标准品(2 mg/ml)1 ml× 2-20℃
储存
BCA Reagent A和BCA Reagent B置于室温保存,BSA蛋白标准品置于-20℃可保存一年。
主要特征
便捷快速:与Lowry法相比,该方法可在1 小时内完成蛋白质定量检测,工作液配制后24h内使用无影响。
灵敏准确:测定范围是20~2000 μg/ml(562 nm读数)。在测定范围内有良好的线性关系,变异系数小。
兼容性好:与Bradford法相比,对去垢剂耐受能力大为提高,在Tween20低于4%,NP40低于5.0%,SDS低于4%,Triton X-100 低于4%的浓度范围内,即可获得准确定量结果(其余物质耐受度详见说明书)。使用微板法测定时将体积按比例减小。
BCA Protein Assay Kit试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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