pUC57 Simple TA/平端通用克隆载体试剂

UC57 Simple通用克隆载体采用了TOPO酶连接技术，载体预先偶联上TOPO酶，当加入PCR扩增产物后，5 min就可以完成

连接反应，连接阳性率高。pUC57 Simple TA/平端通用克隆载体试剂消除了大部分的常用酶切位点，便于后续亚克隆。

该产品适用于Taq酶扩增的含“A"尾巴和高保真酶扩增的PCR产物的连接，载体含有氨苄青霉抗性筛选标记。

优势

快速连接，最快仅需5min；

操作简单，仅需加入载体和片段即可；

无需蓝白斑筛选，阳性率高；

不包含任何酶切位点，便于后续亚克隆。

平末端和A尾产物通用。

注意：引物不能磷酸化。

组分

组分名称D2401（20T）D2402 (20T)

pUC57 Simple Vector(5 ng/μl)20μl20μl

M13F(-47) (10 μM)100μl100μl

M13R(-47) (10 μM)100μl100μl

RTS DH5α冻干感受态2瓶无

Nano E.coli Transfection Reagent1 ml无

储存

RTS DH5α冻干感受态在未溶解状态下，可于-20℃长期保存（>2年），已经溶解后，请-60℃以下保存（3个月）。

pUC57 Simple TA/平端通用克隆载体试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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