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2024-11-01详细介绍
全血microRNA提取试剂盒核酸提取的成功与否、提取质量的好坏对后续实验起着至关重要的作用。使用TRIzol试剂提取总RNA,对总RNA中包含的部分
小RNA进行研究,该方法的缺点是总RNA中microRNA的比例较小,同时由于mRNA的干扰,会导致后续反转录和RealTime
PCR实验效率很低,很难获得理想的实验结果,而且结果并不可靠。在探索miRNA分子功能的过程中开发的全血
miRNA提取试剂盒,通过一步上柱即可获得纯度高达98%的不含大RNA 的miRNA,而且可在45min内完成小RNA的提取。
该miRNA提取试剂盒广泛适用于冻存和新鲜的抗凝全血样本(不适用于血清和血浆),每150μl全血可获得~1μg的microRNA
组分
名称数量
B1803AB1803B
miRNA Reagent A7.5ml30ml
miRNA Reagent B10ml40ml
miRNA 吸附柱25套100套
RnaseFree TE Buffer5ml5ml
储存
室温可保存2年。
全血microRNA提取试剂盒恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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