dNTP Mixture (10 mM each)试剂

dNTP Mixture (10 mM each)试剂为高效加A聚合酶，该酶以RNA为模板在RNA的3′末端加入20~200个A碱基。可应用于增强mRNA的稳定性，

及microRNA加A尾，为cDNA合成提供oligo-dT引物结合位点等。生产的PolyA聚合酶是E.coli来源的，

该酶是以单链RNA 作为模板，ATP作为底物进行聚合反应的。

组分

组分名称数量

Poly(A) Polymerase(5U/μl)20 μl/200 μl

10XEPAP Reaction Buffer500 μl

10 mM ATP100 μl/500 μl

25 mM MnCl2500 μl

来源

重组表达的E.coli来源的Poly(A)聚合酶。

单位定义

在37℃、pH7.9 的条件下，以ATP 为底物，10 分钟内把1 nmol的AMP 聚合到RNA上所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。

应用

RNA 3' 标记增强RNA稳定性microRNA加A尾，为cDNA合成提供oligo-dT引物结合位点

储存

-20°C可保存2年。

dNTP Mixture (10 mM each)试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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