ThermoStable V Reverse transcriptase试剂

ThermoStable V Reverse transcriptase试剂是在鼠源病毒反转录酶基础上进行定点突变改良而得。

该酶去除了RNase H活性中，从而避免反转录过程中降解RNA。同时经过突变文库筛选，使得其热稳定性更强，

可耐受65℃高温反应。相比于低温条件下反转录反应，采用高温反转录可显著打开RNA二级结构，

从而提高复杂RNA模板的扩增性能、提高反转录cDNA的长度和产量，从而提高后续检测的灵敏度。

组分

组分名称数量

ThermoStable V RTase (200 U/μl)100 μl

10×RT Buffer1 ml

单位定义

以poly(rA)为模板、oligo(dT)为引物，在37°C条件下，10分钟内催化1 nmol的dTTP掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量，

定义为一个活性单位。

储存

-20°C可保存2年。

ThermoStable V Reverse transcriptase试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。