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HiFi One-Step RT-PCR Mix(电泳)试剂

简要描述:HiFi One-Step RT-PCR Mix(电泳)试剂,上海雅吉生物科技有限公司登录正版是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒

  • 产品型号:D0405
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-11-01
  • 访  问  量:106

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详细介绍

HiFi One-Step RT-PCR Mix(电泳)试剂本试剂采用稳定高效的RT-PCR预混体系,是以RNA为模板进行一步法RT-PCR的专用试剂。其原理为用基因特异性引物进行反转录反应,获得第一链cDNA(不可使用Oligo(dT)或Random Rimer合成第一链cDNA),再使用基因特异性正向引物和反向引物进行PCR扩增,在同一反应体系中一步完成从反转录到PCR的全部过程。反应体系中已含有电泳所需的指试剂(蓝色和黄色),反应后可以直接进行电泳。

在本试剂中,将耐热M-MLV反转录酶、Rnase Inhibitor、Hotstart高保真DNA聚合酶以及稳定剂等配制成50×One-Step Enzyme Mix预混液;反应Buffer、dNTP以及电泳指示染料配制成5×HiFi One-Step RT-PCR Buffer,因此使得操作更加简单便,扩增产物可用于平端克隆和DNA测序。

组分

组分名称250T

50×One-Step Enzyme Mix100 μl

5×HiFi One-Step RT-PCR Buffer1 ml

RNase Free H2O1 ml×3

注意:1.50×One-Step Enzyme Mix粘度高,第一次使用之前要离心收集至反应管底部,吸取时应缓慢小心。

2.由于使用了Hotstart高保真DNA聚合酶,反应配制可在常温进行,但各组分应-20°C保存。

主要特征

耐热M-MLV反转录酶可在55℃反应能更好的打开复杂二级结构,只需10min即可完成逆转录。

DNA聚合酶为热启动型高保真酶,能够有效的抑制非特异性反应且具有较高的校正活性,酶激活仅需2min。

具有宽泛的模板量兼容性,10 ng~1μg都可有效扩增。

反应过程中无需开盖,避免了操作过程中的污染危害。

储存

请置于-20°C,可保存2年;避免反复冻融。


HiFi One-Step RT-PCR Mix(电泳)试剂


恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR

仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,

NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。

HiFi One-Step RT-PCR Mix(电泳)试剂

应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

HiFi One-Step RT-PCR Mix(电泳)试剂

HiFi One-Step RT-PCR Mix(电泳)试剂更多产品咨询:

A3901Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(8U/ul)

A3901LBst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)无甘油

A3805Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶(8U/ul)

A3805LBst 4.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)无甘油

A3805-00HotStart Bst4.0 DNA/RNA聚合酶(16U/ul)无甘油

A3831-00HotStart Bst4.2 DNA/RNA聚合酶(16U/ul)无甘油

A3831-00HotStart Bst4.2 大规格(125ml包装酶)

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A3828-01Bst 4.0 LS Bead(Low Salt)

A3824-01RBst 4.0 LowSalt Red LyoMix

A3828-01RBst 4.0 LowSalt Red Bead

A3824-02Bst 4.0 Basic Mix (液体预混)

A3828-02Bst 4.0 Basic Bead

A3824-03Bst 4.0 SYBR Green Mix

A3828-03Bst 4.0 SYBR Green Bead

A3828-04Bst 4.0 HNB Bead

A3824-05Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)

A3831-01HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可冻干)

A3831-00HotStart Bst 4.2 DNA/RNA Polymerase(无甘油)

A3831-03HotStart Bst 4.2 Basic Bead(基础冻干球)

A3831-07HotStart Bst 3.2 DNA Polymerase(无甘油)

A3831-05HotStart Bst 4.2 Red Bead(红黄变色冻干球)

A3831-06HotStart Bst 4.2 L-HNB Bead(紫绿变色冻干球)

A3831-20Oligo Lyophilized Solution (引物冻干剂)

A3824-02Bst 4.0 Basic Mix (液体预混)



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