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植物总酚(TP)检测试剂盒(微板法)

简要描述:植物总酚(TP)检测试剂盒(微板法),上海雅吉生物科技有限公司登录正版是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒

  • 产品型号:TP1121
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-08-24
  • 访  问  量:328

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详细介绍

叶绿体是光合作用的细胞器,在光合作用研究中,常需要用提取的叶绿体展开下游研究工作,叶绿体中所含的色素主要有两大类

,叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素),它们与类囊体膜上的蛋白质结合,成为色素蛋白复合

体,其中叶绿素又称叶绿体色素(Chlorophyll);类胡萝卜素是一种脂溶性且具有营养特性的化合物,给植物和动物提供天然色素

,是重要的抗氧化剂,并有能力转换为必需维生素,类胡萝卜素可预防细胞,组织和基因损毁,增强身体免疫系统,抵御感染,

减少癌症风险,保护心脏。


植物总酚(TP)检测试剂盒(微板法)检测原理是类胡萝卜素不溶解于水,而溶于有机溶剂,以有机溶剂粗提类

胡萝卜素,根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的吸光度(A)与其中溶质浓度(C)和液层厚度(L)成正比,即A=αCL,其中α为比例常

数,当溶液浓度以百分比浓度为单位,层液厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。在本试剂盒情况下叶绿素a、叶绿素b、

类胡萝卜素分别在665nm、649nm、470nm处有最大吸收波,根据经验公式可计算出叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、类胡萝卜

素含量,主要用于植物组织中叶绿素、类胡萝卜素的提取以及以酶标仪定量检测叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、类胡萝卜素含量

。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。


操作步骤(仅供参考)

自备材料:

1、蒸馏水

2、电子天平、研钵或匀浆器、离心管或试管

3、低温离心机、恒温箱或水浴锅、酶标仪、酶标板


操作步骤(仅供参考):

1、准备样品∶

①植物样品︰取1g植物组织或水果中层果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情况下充分捣碎研磨或匀浆,4℃ 10000r/min

离心15~20min,留取上清液,-20℃冻存,用于苯丙氨解氨酶的检测。

②血浆、血清和尿液样品︰血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于该试剂盒的测定,-20℃冻存,用于苯丙解氨的检测。

③细胞或组织样品∶取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,4℃ 10000r/min离心15~20min,取上清液,

-20℃冻存,用于苯丙酸解氨酶的检测。④高活性样品︰如果样品中含有较高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸馏水或PAL

Lysis Buffer稀释进行恰当的稀释。

2、PAL加样∶

取96孔板,按照下表设置对照孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,并

注意避免产生气泡。如果样品中的PAL活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置2平行孔,

求平均值。

加入物(μl)对照孔测定孔

蒸馏水150100

待测样本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL检测︰

以对照孔为对照(调零),酶标仪立即测定290nm处测定孔的吸光度(记为   A测定0);40℃准确孵育1h,立即加入10μl PAL终止

液终止反应(备选方案),以对照孔为对照调零,酶标仪立即测定290nm处测定孔的吸光度(记为A测定1)。

注意︰加入PAL终止液终止反应为非必须步骤,可37℃准确孵育1h后直接以对照孔为对照调零,酶标仪立即测定290nm处测定

孔的吸光度。

注意事项∶

1、待测样品中不能含有酶抑制剂,同时需避免反复冻融。

2、获得上清液为PAL酶液,应尽快检测,亦可-20°℃保存。

3、如果没有可测定紫外区的酶标仪和酶标板,也可以使用紫外分光光度计和石英比色皿,但应注意比色杯的最小检测体积。

4、每次检测指标不宜过多,否则操作时间不一,有可能导致样本间的差异。5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。




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