碱性磷酸酶同工酶检测试剂盒(热稳定性法)

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9

.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及

微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及

平滑肌的细胞膜。

碱性磷酸酶同工酶检测试剂盒(热稳定性法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用PNP比色法，其检测原理是

Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物，在酸性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成

p-nitrophenol；在碱性条件下p-nitrophenol转变成醌式结构，呈较深的黄色，产物黄色越深说明碱性磷酸酶活性越高，

反之则酶活性越低，通过比色法(酶标仪)测定400～415nm处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平

，可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性。该试剂盒仅用于科研领域

，不适用于临床诊断或其他用途。

计算：碱性磷酸酶金氏活性单位的定义：在 37℃条件下，100ml 待测样品与显色底物(即 ALP

显色液所含物质)作用 15min，产生 1mg 酚为一个金氏单位。

以系列 Phenol 标准(1～6 号)对应的金氏单位(5、10、20、30、40、50U/L)为横坐标，以相应

的 A 标准(1～6 号)为纵坐标，绘制标准曲线。以 A 测定-A 对照的差值为实际的吸光度，用

该差值与标准曲线进行对比，求出酶活力单位。

参考区间(37℃)：

健康成年人 3～13 金氏单位

健康儿童 5～28 金氏单位

注意事项：

1、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。

2、如果没有酶标仪，也可以使用分光光度计测定，但应注意 96 孔板最大检测体积。

3、所测样品的值高于标准曲线的上限，应稀释样品后重新测定。

4、空白孔如果显红色，说明 ALP 显色液不可用，应丢弃。

5、加入显色基液时应迅速，并且及时混匀，否则显色不充分。

6、如无法检测 510nm，亦可检测 500～530nm 范围内吸光度。

7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录：参考标准曲线范围：测定 Phenol 标准在 5~50U/L 金氏单位时，通过酶标仪 505nm 测

定其吸光度多在 0.1~1.0 之间，标准曲线参考如下：

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