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2024-11-01详细介绍
天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中,是细胞壁的一种组成成分,
它们伴随纤维素而存在,构成相邻细胞中间层粘结物,使植物组织细胞紧紧黏结在一起。原果胶是不溶于水的物质,但可在酸
、碱、盐等化学试剂及酶的作用下,加水分解转变成水溶性果胶。果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸,是由D-半乳糖醛酸以α-1,4
糖苷键连接形成的直链状聚合物,本质上是一种线形的多糖聚合物,含有数百至约1000个脱水半乳糖醛酸残基,
其相应的平均相对分子质量为50000~150000。
原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑比色法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸,后者在硫酸溶液中与咔唑进行缩合
反应形成紫红色的化合物,该化合物呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比,该化合物颜色在反应1~2h内呈色最深,当反应液颜色
最深时在波长530nm处测定吸光度,通过与标准曲线比较,计算出样品中可溶性果胶含量。该试剂盒主要用于定量检测植物组织
或果实中可溶性果胶含量,该50T试剂盒可以检测50~60个样品。该产品仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):
1、取内径为8mm的玻璃试管2支,分别加入白陶土-脑磷脂混悬液0.2ml。
2、静脉采血1ml,立即取下针头,沿管壁向各试管注入血液0.5ml,立即混匀并启动秒表计时,并置于37℃水浴中。
3、每隔10s轻摇试管一次,观察管内血液流动情况,直至血液凝固。记录血液凝固所需时间,即为ACT。
4、取2支试管血液凝固时间的平均值作为ACT 值。
计算:参考区间: (1.77±0.76)min
4、配制标准品工作液︰如果检测血清、尿液等样品,按取丙酮酸标准(6mg/ml):蒸馏水=1:99的比例配制,使浓度达到60μg/ml,如果检测组织样品按丙酮酸标准(6mg/ml) :组织匀浆液(1×)=1:99的比例配制,使浓度达到60μg/ml。
注意事项:
1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20°C.
2、实验用蒸馏水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷却后的蒸馏水,并盖紧口。
3、TA滴定液为碱性溶液,有腐蚀性,请小心操作。
4、TA标定液容易长菌,宜4℃保存,一旦发现有絮状物请弃用。
5、果实中含酸量较少时可将TA滴定液适当稀释后使用,可考虑用0.01~0.05M TA滴定液进行滴定。
6、TA滴定液含量计算公式中,V0最好为3次空白测定的平均值。
7、如果所测样品的浓度过高,应用TA Lysis Buffer工作液稀释样品后重新测定,并将稀释倍数带入公式。
8、如果样品颜色较深,滴定终点不易观察,应采用电位滴定法。
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