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2024-11-01详细介绍
在肝脏中脂肪酸经β氧化生成乙酰,再合成酮体,酮体是脂肪酸在肝脏进行正常分解代谢所生成的特殊中间产物,
但肝脏不能利用酮体,必须经血液运送至肝脏外组织特别是肌肉、肾脏,再转变为乙酰而被氧化利用。
组织酮体定性检测试剂盒(辛酸钾法)以辛酸钾为底物,所产生的酮体在有铵离子存在的碱性环境中,与亚硝酸铁作用生成紫色化合物主要用于定性鉴定人、
动物肝组织、肌肉组织等中酮体情况。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):
1、取内径为8mm的玻璃试管2支,分别加入白陶土-脑磷脂混悬液0.2ml。
2、静脉采血1ml,立即取下针头,沿管壁向各试管注入血液0.5ml,立即混匀并启动秒表计时,并置于37℃水浴中。
3、每隔10s轻摇试管一次,观察管内血液流动情况,直至血液凝固。记录血液凝固所需时间,即为ACT。
4、取2支试管血液凝固时间的平均值作为ACT 值。
计算:参考区间: (1.77±0.76)min
4、配制标准品工作液︰如果检测血清、尿液等样品,按取丙酮酸标准(6mg/ml):蒸馏水=1:99的比例配制,使浓度达到60μg/ml,如果检测组织样品按丙酮酸标准(6mg/ml) :组织匀浆液(1×)=1:99的比例配制,使浓度达到60μg/ml。
注意事项:
1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于-20°C.
2、实验用蒸馏水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷却后的蒸馏水,并盖紧口。
3、TA滴定液为碱性溶液,有腐蚀性,请小心操作。
4、TA标定液容易长菌,宜4℃保存,一旦发现有絮状物请弃用。
5、果实中含酸量较少时可将TA滴定液适当稀释后使用,可考虑用0.01~0.05M TA滴定液进行滴定。
6、TA滴定液含量计算公式中,V0最好为3次空白测定的平均值。
7、如果所测样品的浓度过高,应用TA Lysis Buffer工作液稀释样品后重新测定,并将稀释倍数带入公式。
8、如果样品颜色较深,滴定终点不易观察,应采用电位滴定法。
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