孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法)

孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法)也称红血球，是血液中数量最多的一种血细胞，脊椎动物体内通过RBC运送氧气，

RBC同时还具有免疫功能，在贫血检查中可通过红细胞渗透脆性试验来检测红细胞膜的缺陷。

(Erythrocyte Incubated Osmotic Fragility Assay Kit )检测原理是将患

者血液置于37℃孵育24h，使红细胞代谢继续进行，由于葡萄糖的消耗，储备的ATP减少，导致需要能量的红细胞膜对阳离

子的主动传递受阻，造成钠离子在红细胞内聚集，细胞膨胀，孵育渗透脆性增加，某些有细胞膜缺陷以及某些酶缺陷的红细

胞的葡萄糖和ATP很快被耗尽时，孵育渗透脆性明显增加，该实验被称为红细胞孵育渗透脆性试验，主要用于检测人、

动物血液的红细胞孵育渗透脆性，并计算红细胞中性脆性(MCF)。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

三、自备材料：

1、离心管或小试管

2、蒸馏水

3、酶标仪、96孔板

四、操作步骤(仅供参考)：

1、配制组织匀浆液(1×)∶取10ml组织匀浆液(3×)加入20ml蒸馏水即成。

2、配制PA Assay Buffer (1x)∶取10ml PA Assay Buffer (1.5×)加入5ml蒸馏水即成。

3、准备样品︰

①血清、尿液及其他体液样品:血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20°C冻存。

②组织样品︰称取1g组织样品置于匀浆器中，再加入1ml组织匀浆液(1x)仔细研磨，振摇提取静置30min ,取上清液4000rpm离心10min ,取上清液,用组织匀浆液(1×)定容至2ml , -20℃冻存，用于PA的检测。

③植物材料︰称取1g植物材料置于匀浆器中，再加入1ml组织匀浆液(1×)仔细研磨，振摇提取,静置30min ,取上清液4000rpm离心10min ,取上清液,用组织匀浆液(1×)定容至2ml , -20℃冻存，用于PA的检测。

④高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的PA，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，如鸡血清可稀释5～10倍后检测。

4、配制标准品工作液︰如果检测血清、尿液等样品，按取丙酮酸标准(6mg/ml):蒸馏水=1：99的比例配制，使浓度达到60μg/ml，如果检测组织样品按丙酮酸标准(6mg/ml) :组织匀浆液(1×)=1:99的比例配制，使浓度达到60μg/ml。

注意事项:

1、实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于-20°C.

2、实验用蒸馏水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷却后的蒸馏水，并盖紧口。

3、TA滴定液为碱性溶液，有腐蚀性，请小心操作。

4、TA标定液容易长菌，宜4℃保存，一旦发现有絮状物请弃用。

5、果实中含酸量较少时可将TA滴定液适当稀释后使用，可考虑用0.01~0.05M  TA滴定液进行滴定。

6、TA滴定液含量计算公式中，V0最好为3次空白测定的平均值。

7、如果所测样品的浓度过高，应用TA Lysis Buffer工作液稀释样品后重新测定，并将稀释倍数带入公式。

8、如果样品颜色较深，滴定终点不易观察，应采用电位滴定法。

孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法)更多产品咨询：

M2301Super ECL Substrate

M2501Western信号增强剂

M3102Western一抗二抗通用稀释液

M2401Western一抗二抗去除液

C1801HpCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒

C0801SUMO 蛋白酶

C0801PSUMO 蛋白酶切对照融合蛋白

C0501rTEV蛋白酶

C5008RnaseH

C5009T5核酸外切酶

C5010热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)

C5014核酸外切酶I(E.coli)

C5029南极热敏UDG

C5029南极热敏UDG

C5061Afu UDG (2U/µl)

C5020Lambda核酸外切酶

C5021T7核酸外切酶

C5043ThermoStable dsAP Nuclease (20 U/μl)

D3001Dnase I(Rnase free)

S0123Rnase A(20mg/ml)

C5023Exonuclease T

C5024Exonuclease VII

C5026Exonuclease III

C5027Endonuclease IV

C5044Thermostable  RnaseH

C2002无内毒素Benzonase核酸酶

C2003Strep tagII Benzonase核酸酶(科研级)

C2004无内毒素Strep tagII Benzonase核酸酶

C2006冻干品Benzonase核酸酶

C5051AExtreme Thermostable Rnase HII（极耐热Rnase HII）

C5051BExtreme Thermostable Rnase HII（极耐热Rnase HII）

C5052Ribonuclease R(Rnase R) 核酸外切酶