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2024-11-01详细介绍
ORF1ab LAMP Primer Set试剂在核酸分子的恒温扩增过程中,无论采用LAMP、CPA等扩增技术,这种高速度的扩增特性,均不可避免的引起假阳性扩增。
这种假阳性的扩增情况在LAMP扩增中表现尤为明显,由于LAMP扩增用到很高浓度的引物,因此难免保证有少量错配和引物
Dimer,这些轻微的污染都会导致在LAMP高速扩增中造成假阳性。HaiGene优化的反应缓冲液,配合的显色技术和阴性
控制技术建立的预混恒温mix系列产品,可高灵敏度、高特异性的用于LAMP pH变色、橙绿(OG)变色、HNB变色、
SYBR Green荧光检测。在LAMP扩增实验中,与其它公司提供的LAMP Mix相比,得益于 Bst 4.0 DNA/RNA聚合酶的出色性能
,Bst 4.0 Mix具有更快的扩增速度和杂质耐受性。
Bst 4.0 MasterMix及冻干微球系列特点
SYBR GreenHNB变色基于pH指示变色橙绿变色
检测方法定量PCR或 恒温荧光仪裸眼观察裸眼观察裸眼观察
显色染料SYBR GreenHNB染料pH指示染料OG染料
阳性判读方式扩增曲线天蓝色为阳性黄色为阳性绿色为阳性
反应时间15-25min20-35min20-30min15-25min
灵敏度(copies/test)5-25 copies5-50 copies5-50 copies5-50 copies
抗杂质能力强强对样本ph敏感强
缓冲盐耐受性强强非常低强
恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起始前,下图为 65 度反应 30min 后。
应用实例2:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例3: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
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A3824-01Bst 4.0 LowSalt Mix
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A3828-03Bst 4.0 SYBR Green Bead
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