HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可冻干)试剂

HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可冻干)试剂为浓度 3.125x 的浓缩

试剂，包含了 Helicaser、dNTP、Mg

2+、反应缓冲盐、冻

干赋形剂和稳定剂。HotStart Bst4.2 DNA/RNA 聚合酶为

单独的组分。本品针对于具有冻干经验的研究者，直接进

行后续冻干，无需再加入任何其它辅料。

 Bst4.2 具有以下性能：（1）Bst 4.2 全系包含热启动

Aptamer，该配体确保酶在<30℃时，酶活封闭效率>95%,

在>60℃时 1min 内释放酶活。该特性利于室温建立

反应体系，并大幅降低了低温条件下的非特异扩增；（2）

反应温度提升到 70℃，大幅降低引物 Dimer 的形成，提

高扩增特异性，并使得粗样品核酸释放更加充分；（3）全

系包含 Helicaser，因此，允许在不使用 F3/B3 引物的情

况下进行 LAMP 扩增（easy LAMP），并允许 FIP/BIP 的

引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增，并使得

扩增均一性大幅提升。

本品为多用途的试剂，适用于 LAMP 进行 Molecular 

Beacon 探针、DP-LAMP 探针、试纸条等检测。

名 称 200T

3.125xBst4.2 Basic Mix(可冻干) 1.6 ml

HotStart Bst 4.2 (16U/μl) 100 μl

储存：长期保存请置于-20℃以下（18 个月有效）；制品反复冻融

10 次不影响性能，但应避免反复冻融；制品由于含有高浓度的糖

组分，-20℃保存的制品，在融化时可能会有结晶物。此时

3.125xBst4.2 Basic Mix 可在 37℃进行融化，而 Bst4.2 酶制

品在 30℃的温度下融化，过高的温度可能会导致热启动性能下降。

一经融化推荐置于 2-8℃保存，在此条件下制品稳定储存 1 个月。

特殊说明：

（1） Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 扩增时的推荐

反应温度为 70℃，最佳反应温度为 70℃。

（2） 制品中包含高浓度的盐组分，使用时做好个人防护，防止制

品与皮肤、眼、鼻、呼吸道等接触和吸入，一旦接触或吸入，请用

大量的清水冲洗。

（3）防止气溶胶污染，尽可能进行分区操作。

1. 10xLAMP Primer Mix 的配制

标准 LAMP eLAMP

FIP/BIP 16 µM each 8~16 µM each

LF/LB 4~8 µM each 4~8 µM each

F3/B3 2 µM each 非必须

注意：eLAMP（easy LAMP）为去除 F3/B3 引物的方法，

为 Bst4.2-3.2 系列专用的使用策略，对于大多数引物组，

在 Helicaser 的加持下，扩增速度几乎不受影响。

2. 配制 LAMP 反应体系

3.125xBst4.2 Basic Mix 8 μl

10x Primer Mix 2.5 μl

HotStart Bst 4.2(16U/μl) 0.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到总体积 25 μl

反应体系配好后，置于 70°C 反应 20~40min。

3. 试剂的冻干反应（仅限专业人员）

本试剂可供具有冻干经验的人员直接进行后续冻干，试剂的配方对

冻干条件不苛刻。但对于不同的用户来讲，由于冻干形式、冻干体

积、上机量、冻干容器、冻干磨具等因素存在差异，以下程序仅供

参考。进一步的程序优化均需根据具体情况自行调整。对于非专业

人员来讲，请直接采购 HaiGene 的冻干制品，或委托订制。

3.125xBst4.2 Basic Mix 8 μl

25xPrimer Mix 1 μl

HotStart Bst 4.2（16U/μl） 0.5 μl

ddH2O 到总体积 9.5-10 μl

制品成型后的冻干程序：

-50℃预冻 10min； -50℃ 4-8h（真空段）；-50℃升温到 25℃（每

小时升温 5℃）；25℃ 2h； 25℃恒温。

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