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Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)试剂

简要描述:Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)试剂,上海雅吉生物科技有限公司登录正版是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒

  • 产品型号:A3824-05
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-10-31
  • 访  问  量:271

详细介绍

Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)试剂该制品为双组分的试剂,Basic Buffer Mix 包含了

反应缓冲液、Mg

2+、dU/A/C/GTP(不含 dTTP)、冻干赋形

剂,酶 Mix 包含 Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶、热敏 UDG。

得益于 Bst 4.0 识别 dUTP 底物,反应底物中不包含

dTTP,因此扩增产物均为 dUTP 产物,在配合热敏 UDG

的情况下,实现防污染性能。在实际测试中,含有 10e5 

Copies 的污染物的条件下,抑制污染扩增。

本制品尤其适用于开盖的 LAMP 反应(如试纸条检

测)、密封腔体(污染风险较高)的检测试验(如定量 PCR

腔体)。试剂使用特点:(1)Basic Buffer Mix 中不含染料,

可自行添加 SYBR Green、Eva Green 等染料进行荧光检

测。(2)本试剂适用于开盖检测如核酸试纸条检测。(3)

试剂中含有冻干赋形剂,试剂可直接冻干,无需再优化冻

干配方。

名 称 100T 2000T

2.5xBst4.0 Basic BufferMix1 ml  20 ml

25xBst4.0/UDG Enzymes 0.1 ml1ml x2

储存:-20℃保存 1 年;-80℃保存 2 年;短期使用放置于

2-8℃,保存 1 个月。反复冻融 10 次,不影响使用。如有

白色沉淀,于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀,不影响

使用。

使用方法:

1. 配制 LAMP 反应体系

2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl

25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到总体积 25 μl

10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、

LoopF/B 分别为 4~8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。

注意:如何应用核酸试纸条进行特异性检测,可来信咨询。

2. 反应体系配好后,室温(25-37°C)放置 2min,以消

化去除潜在的核酸污染,随后置于 65°C 进行反应

15~30min。

试剂冻干策略(有冻干经验人员操作):

1. 配制 LAMP 冻干体系

2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl

25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

ddH2O 到体积 1.5 μl

冻干总体积 15 μl

2. 体系配制完毕后,加入 0.2 ml EP 管进行上机冻干。

该试剂的冻干体积为 15 μl, 检测反应体积为 25 μl。

特别说明:

(1)本试剂防污染原理为:热敏 UDG 消化去除含有 dUTP

的扩增产物,热敏 UDG 在随后 50℃以上迅速失活,并不

影响后续 LAMP 扩增。因此,本试剂无法去除采用 dTTP

扩增的污染物,也不能消化天然的核酸底物(DNA/RNA)。

为避免扩增气溶胶污染,实验室应长期使用本试剂进行实

验,一旦使用 dTTP 试剂扩增后,造成实验室污染,采用

本试剂不会消除假阳性扩增。

(2)本试剂适用基于 OG 染料变色法、SYBR Green 法、

基于 Biotin/FAM 探针的核酸胶体金法(HaiGene 具有胶

体金法特异性使用策略,如需技术支持,请来信咨询)。

本试剂不支持 HNB、pH 显色法。其它使用策略自行优化

调整。

(3)基于本试剂,HaiGene 提供冻干制备服务。八联管

起订量 480T,冻干球起订量 2000T。

微信图片_20210909182641.jpg

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