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Bst 4.0 HNB Bead试剂为全组分冻干品试剂,包含了标准反应缓冲液、
HNB 染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,
使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒温扩增。
Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依赖于 RNA 模板的聚合酶
活性(逆转录),还具有依赖于 DNA 的聚合酶活性,因此
无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行高效的恒温
扩增。该制品是进行 LAMP 及 RT-LAMP 扩增反应的
试剂。优化的反应体系,确保快速的完成检测试剂的反应
体系建立。
在 LAMP 扩增起始前 HNB 染料与 Mg2+结合表现出
肉眼可见的紫罗兰色,当阳性扩增发生时 Mg2+被 LAMP
反应的副产物焦磷酸螯合,HNB 染料无法与 Mg2+结合表
现出肉眼可见的天蓝色。由此判断天蓝色为阳性扩增。该
显色方法受样本缓冲盐、pH 等影响较小,适用的样本较
pH 显色法通用性更强。
货 号 名 称 规格
A3828-04 Bst4.0 HNB Bead 100 个
储存:-20℃保存 2 年;室温(25℃)保存>6 个月。
使用冻干微球进行全扩增体系用品的制备方法:将优化的
扩增引物分装于 0.2 ml EP 管底部,于 70-80℃条件烘干
1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已经含有干燥的扩增引物,
再加入一粒冻干微球即可制备成全扩增体系干燥品,该干
燥品无需冷链运输,可长期保存。
反应体系说明:每一个冻干微球为按照 25 μl 反应体系建
立,在使用时只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可进
行反应。
使用实例:
1. 配制反应体系
在 0.2 ml EP 反应管中加入下述试剂
Bst4.0 HNB Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到液体总量 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、
LoopF/B 分别为 8 μM、F3/B3 分别为 2 μM
2. 反应体系配好后,置于65°C进行反应25~45min。肉
眼观察结果,天蓝色为阳性,紫罗兰色为阴性。
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A3828-03Bst 4.0 SYBR Green Bead
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