详细介绍
Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)试剂与Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段相
比,Bst 3.0 DNA聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的
逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板,该酶都具有5’-3’
的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性,但该酶5’-3’和3’-5’
的外切酶活性缺失。
在以RNA为模板的LAMP实验中,可实现单酶系统反应。
该酶在60-65°C之间具有很好的反转录活性,可有效解决具
有二级复杂结构的RNA模板的反转录,而Bst 2.0 DNA 聚合
酶和Bst DNA 聚合酶大片段无此活性。
组分
名称 16KU
Bst 3.0 DNA/RNA
Polymerase(glycerol free) (32 U/μl)
500 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 20 ml
100 mM Mg2+ 20 ml
Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)试剂注意:该酶制品中不含有甘油,可用于建立冻干体系。
单位定义:
一个活力单位即在 65°C 条件下,30 分钟内催化 10 nmol
dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
储存:-20℃ 可保存 3 年。
典型的 LAMP 反应
1. 按以下组分配制 LAMP 反应液
Bst 3.0 DNA/RNA Polymerase (32 U/μl) 0.05~0.25 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA/RNA 10ng~1 μg
*10X Primers 2.5μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers:16 µM FIP/BIP, 2 µM F3/B3, 4 µM LoopF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
使用注意事项:
(1) Mg2+的使用浓度为 4~10 mM 浓度,Isothermo Buffer
中没有 Mg2+,通常情况下,在 6-8 mM Mg2+条件下可获得
较好的 LAMP 结果。
(2) 有文献报道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用无模板 DNA 作为对照检测扩增的特异性。
产品咨询
技术支持:化工仪器网 管理登陆 sitemap.xml