收到细胞后,首先要检查包装是否完整,确保没有破损或泄漏。
1:若发现有破损或漏液情况,及时拍照,并联系售后。
用75%酒精擦拭培养瓶表面,放置于显微镜下观察细胞状态。
2:发现细胞状态异常,及时拍照,并联系售后。
确保外包装无破损或泄露,显微镜下观察细胞无异常后,细胞静置于培养箱中2~4h,稳定细胞状态。
将生物安全柜进行酒精消毒和紫外灭菌,为细胞的复苏提供一个无菌的环境。
仔细阅读细胞附带的说明书,按照要求准备好基础培养基、血清、因子、胰酶和双抗等必要物品。
3:不要随意更改培养条件,以确保细胞的正常生长。
4:镜检并拍照。根据镜检情况,进行下一步处理。
镜检时
不同镜检结果
A. 细胞漂浮。
查阅细胞说明书,若细胞为悬浮细胞、半贴壁细胞或疏松贴壁细胞,出现较多细胞漂浮为正常情况,建议继续培养,或收集悬浮细胞,置于新的培养瓶中培养。
若细胞为贴壁细胞,及时拍照,联系售后。
B. 细胞为贴壁细胞,且正常贴壁生长,但细胞密度低于90%。
吸出培养瓶中培养基,留5mL左右继续培养,待细胞生长至90%以上后,继续传代培养,初次传代建议1:2传代。
C. 细胞为贴壁细胞,且正常贴壁生长,密度达到90%以上。
可直接传代培养,初次传代建议1:2传代。
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