铜检测试剂盒(Cuprizone 微板法)操作説明

铜检测试剂盒(Cuprizone 微板法)

产品简介：

铜是人体重要的微量元素，是酶的重要组成部分如铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)、超氧化物歧化酶、

细胞色素氧化酶等，总含量约为 90mg，有 90~95%的铜与球蛋白结合，形成铜蓝蛋白，5~10%的铜

与清蛋白结合，清蛋白可作为血浆铜的载体，铜的检测方法有分光光度计、原子吸收光谱法、中

子活化分析法等。

上海雅吉生物科技有限公司登录正版铜检测试剂盒(Cuprizone 微板法)检测原理是在酸性介质中与白蛋白结合的铜从

白蛋白中解离出来，经沉淀蛋白质后铜离子与 Cuprizone 络合，形成稳定的蓝色络合物，通过酶

标仪测定 620nm 处吸光度，形成的蓝色与血清、血浆铜成线性关系，与标准品比较，根据公式计

算出铜含量，该检测试剂盒在 62.8μmol/L 以下线性关系良好，特异性高，较为灵敏。该试剂

盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。 产品组成：

名称 100T Storage

试剂(A):铜标准(100μg/ml) 1ml 4℃避光

试剂(B):铜标准稀释液 5ml RT

试剂(C):CU 酸化液 15ml 4℃

试剂(D):Lea 蛋白沉淀液 25ml 4℃避光

试剂(E):Cu Assay Buffer 2x10ml 4℃

试剂(F):Cuprizone 显色液 1.2ml 4℃避光

试剂(G):ddH2O 10ml RT

自备材料：

1、酶标仪、96 孔板

2、1.5ml 离心管或试管

3、离心机

操作步骤(仅供参考)：

1、制备样品∶血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于该试剂盒的测定，

-20℃冻存，用于 Cu 的检测。

2、配制铜标准工作液︰取适量的铜标准(100μg/ml)，按铜标准(100μg/ml)∶

铜标准稀释液=1:24 的比例配制铜标准(4μg/ml)，即为铜标准工作液;4℃避光

保存，3 个月有效。

3、Cu 加样∶最好选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥试管或者一次性无菌

聚乙烯 1.5ml 离心管，以及洁净 96 孔板，如果无法达到上述要求，应尽量避免

使用铜污染的器皿，按下表操作。

4、Cu 测定∶混匀，室温静置 20min，以空白调零，酶标仪 620nm 处测定标准孔

和测定孔的吸光度(即为 A 标准和 A 测定)。

计算:

血浆、血清铜(μmol/L)=(A 测定/A 标准）×62.8

式中∶A 测定=测定管的吸光度

A 标准=标准管的吸光度

铜标准(4μg/ml)=铜标准(62.8μmol/L)

μg/dl=μmol/L/0.157

参考区间∶

成年健康人血清铜︰

男性∶10.99~21.98μmol/L(70~140μg/dl)

女性∶12.56~23.55μmol/L(80~150μg/dl)

注意事项∶

1、如果样品浓度过高，应用去离子水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。

2、实验过程中用到的水，不可用普通的蒸馏水，尽量采用高纯度的去离子水。

3、玻璃器材尽量用 10%的盐酸浸泡 24h，取出后用去离子水冲洗后才可以使用。

4、试验中仪器、试管、注射器等尽量避免铜污染。

5、测定波长可选 600~640nm，检测结果差异不大。

6、该试剂盒呈色稳定，显色后在 4~20℃可稳定 1h。

7、随着时间的延长，颜色会变浅或消失，应在 1h 内检测完毕。

8、Cu Assay Buffer 应密闭保存，用完立即盖紧盖子，防止有效成分挥发。

9、经典标准品采用铜标准(2μg/ml)，如仪器精密干扰小，可以采用铜标准

(2μg/ml)，其计算公式为︰血浆、血清铜(μmol/L)=(A 测定/A 标准)×31.4。

有效期∶12 个月有效﹔常温运输，4C 保存。