铜检测试剂盒(Cuprizone微板法)操作方法

铜检测试剂盒(Cuprizone微板法)

产品简介：

铜是人体重要的微量元素，是酶的重要组成部分如铜蓝蛋白(亚铁氧化酶)、超氧化物歧化酶、细胞色素氧化酶等，总含量约为90mg，有90~95%的铜与球蛋白结合，形成铜蓝蛋白，5~10%的铜与清蛋白结合，清蛋白可作为血浆铜的载体，铜的检测方法有分光光度计、原子吸收光谱法、中子活化分析法等。

上海雅吉生物科技有限公司登录正版铜检测试剂盒(Cuprizone微板法)检测原理是在酸性介质中与白蛋白结合的铜从白蛋白中解离出来，经沉淀蛋白质后铜离子与Cuprizone络合，形成稳定的蓝色络合物，通过酶标仪测定620nm处吸光度，形成的蓝色与血清、血浆铜成线性关系，与标准品比较，根据公式计算出铜含量，该检测试剂盒在62.8μmol/L以下线性关系良好，特异性高，较为灵敏。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

自备材料：

1、酶标仪、96孔板

2、1.5ml离心管或试管

3、离心机

操作步骤(仅供参考)：

1、制备样品∶血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Cu的检测。

2、配制铜标准工作液︰取适量的铜标准(100μg/ml)，按铜标准(100μg/ml)∶铜标准稀释液=1:24的比例配制铜标准(4μg/ml)，即为铜标准工作液;4℃避光保存，3个月有效。

3、Cu加样∶最好选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥试管或者一次性无菌聚乙烯1.5ml离心管，以及洁净96孔板，如果无法达到上述要求，应尽量避免使用铜污染的器皿，按下表操作。

4、Cu测定∶混匀，室温静置20min，以空白调零，酶标仪620nm处测定标准孔和测定孔的吸光度(即为A_标准和A_测定)。

计算:

血浆、血清铜(μmol/L)=(A_测定/A_标准）×62.8

式中∶A_测定=测定管的吸光度

A_标准=标准管的吸光度

铜标准(4μg/ml)=铜标准(62.8μmol/L)

μg/dl=μmol/L/0.157

参考区间∶

成年健康人血清铜︰

男性∶10.99~21.98μmol/L(70~140μg/dl)

女性∶12.56~23.55μmol/L(80~150μg/dl)

注意事项∶

1、如果样品浓度过高，应用去离子水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。

2、实验过程中用到的水，不可用普通的蒸馏水，尽量采用高纯度的去离子水。

3、玻璃器材尽量用10%的盐酸浸泡24h，取出后用去离子水冲洗后才可以使用。

4、试验中仪器、试管、注射器等尽量避免铜污染。

5、测定波长可选600~640nm，检测结果差异不大。

6、该试剂盒呈色稳定，显色后在4~20℃可稳定1h。

7、随着时间的延长，颜色会变浅或消失，应在1h内检测完毕。

8、Cu Assay Buffer应密闭保存，用完立即盖紧盖子，防止有效成分挥发。

9、经典标准品采用铜标准(2μg/ml)，如仪器精密干扰小，可以采用铜标准(2μg/ml)，其计算公式为︰血浆、血清铜(μmol/L)=(A_测定/A_标准)×31.4。

有效期∶12个月有效﹔常温运输，4C保存。

注意∶由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动，该值仅供参考，对于要求精确计算铜含量的，可以采用标准曲线进行多点测定;根据上海雅吉生物科技有限公司登录正版测定经验显示，标准品浓度在0.5μg/ml 以下，50μg/ml 以上，标准曲线会有偏差。