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辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(比色法)

更新时间:2024-04-15      点击次数:224

辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(比色法)

一、产品简介:

辅酶Q(CoenzymeQ,CoQ)是一种生物体内广泛存在的脂溶性醌类化合物,故又称泛醌,在体内呼吸链中质子移位及电子传递中起重要作用,是呼吸链中重要的递氢体,它是细胞呼吸和细胞代谢的激活剂,也是重要的抗氧化剂和非特异性免疫增强剂。对多种酶有激活作用。不同生物体来源的辅酶Q其侧链异戊烯单位的数目不同,人类和哺乳动物是10个异戊烯单位,故称辅酶Q10。辅酶Q10是辅酶Q类的重要成员之一,它们与线粒体内膜相结合,广泛参与体内的生物代谢过程。辅酶Q10不仅能给心脏提供动力,还具的抗氧化,清除自由基功能,能预防血管壁脂质过氧化,预防动脉粥样硬化,并且无任何毒副作用。具体作用体现在以下四个方面:

①帮助保护心脏辅酶Q10有助于为心肌提供充足氧气,预防突发性心脏病,尤其在心肌缺氧过程中辅酶Q10发挥关键性改善作用。

②保护皮肤长期使用辅酶Q10能够有效防止皮肤衰老,减少脸部皱纹。

③抗疲劳辅酶Q10使细胞保持良好健康的状态,因而机体充满活力,精力旺盛,脑力充沛。它是细胞自身产生的天然抗氧化剂和细胞代谢启动剂,具有保护和恢复生物膜结构的完整性、稳定膜电位作用,是机体的非特异性免疫增强剂,因此显示出抗疲劳作用。

④防癌抗癌研究表明,辅酶Q10有抗肿瘤作用,临床对于晚期转移性癌症有一定疗效。

上海雅吉生物科技有限公司登录正版辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(比色法)其检测原理是待测样品在碱性条件下,EC取代了CoQ10上的甲氰基,形成蓝色化合物,通过分光光度计或酶标仪测定620nm处吸光度值,根据标准曲线即可测出辅酶Q10的含量。本产品可用于测定花生、牛肉、沙丁鱼、保健品等食品中的CoQ10的含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

二、产品组成:

名称规格

50T

存储

试剂(A):CoQ10标准(5mg/ml)

0.5ml

-20℃避光

试剂(B):EC solution

25ml

RT避光

试剂(C):EC buffer

100ml

RT

试剂(D):CoQ10 Assay buffer

25ml

RT

使用说明书

一份

三、自备材料:

1、无水乙醇

2、比色杯或96孔板

3、分光光度计或酶标仪

四、操作步骤(仅供参考)

1、稀释标准品:用EC buffer稀释CoQ10标准(5mg/ml)至0.5mg/ml,

-20℃保存备用。

2、准备样品:取新鲜动物心脏或肝脏等样品,采用醇碱皂化法、溶剂皂化法等提取适量的CoQ10提取液,-20℃保存备用。

3CoQ10加样:按照下表设置空白、标准和测定,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的CoQ10浓度过高,可适当减少样品用量或用EC buffer稀释后再进行测定。

普通分光光度计(2ml比色杯)CoQ10测定

加入物(ml)

空白管

标准管

测定管

EC buffer

2

1.75

1.75

CoQ10标准(0.5mg/ml)

0.25

待测样品(提取液)

0.25

EC solution

0.5

0.5

0.5

CoQ10 Assay buffer

0.5

0.5

0.5

酶标仪CoQ10测定

加入物(μl)

空白孔

标准孔

待测孔

EC buffer

200

175

175

CoQ10标准(0.5mg/ml)

-

25

-

待测样品(提取液)

-

-

25

EC solution

50

50

50

CoQ10 Assay buffer

50

50

50












4、CoQ10测定:混匀,室温避光孵育3~5min,以空白管调零,比色杯光径1cm,分光光度计或酶标仪600~640nm处测定标准管或测定管的吸光度。

计算:

液体样品辅酶Q10浓度:CoQ10(mg/ml)=A测定/A标准×0.5

液体样品辅酶Q10含量:CoQ10(mg)=A测定/A标准×0.5×VT

100g固体样品辅酶Q10含量:CoQ10(mg/g)=A测定/A标准×0.5×VT×100/m

式中:A测定=测定管的吸光度

A标准=标准管的吸光度

0.5=CoQ10标准的浓度(mg/ml)

VT=CoQ10提取液的总体积(ml)

m=品的实际用量(g)

注意事项:

1、待测样品中不能含有CoQ10抑制剂,同时需避免反复冻融。

2、在皂化过程中,震荡不要剧烈,以免形成乳化层。

3、CoQ10 Assay buffer 如果出现浑浊或絮状物,应弃用。

4、CoQ10标准梯度应准确,尽量减少不必要的误差

5、EC solution有一定毒性,请小心操作。

6、检测标准品时,按步骤3表格混合后,2min内即出现明显的蓝色变化并逐渐加深,20min后蓝色开始变浅,30min 后逐渐呈黄绿色。620nm检测数据表明,随着时间的延长,OD值在不断的下降,对应的颜色也已发生变化,特别是高浓度的标准品变化比较大。因此,应在出现最深的蓝色结果且稳定的时间段内尽快检测,而且建议每次同时检测标准品(0.3~0.5mg/ml)和样品。如有条件,最好用酶标仪检测,减少因检测时间导致的误差。

7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6 个月有效。



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