细胞复苏后状态不佳，该如何调整

细胞复苏后状态不佳，该如何调整？

细胞复苏后状态差的原因及解决方法，复苏时可根据以下情况及时进行调整。

1. 细胞冻存不当

解决方法：可以尝试调整细胞状态，加大血清比例，后面再继续传代调整。

2. 自行制备的冻存细胞无活性

解决方法：制备冻存细胞时使用传代次数少且处于对数期的细胞；提高冻存密度有助于提升复苏存活率，推荐密度为100~300万细胞/mL。

3. 细胞复苏方法不当

解决方法：复苏讲究“快融"，越快融化，细胞所受损伤就越小。确保冷冻细胞解冻迅速，接种前用预热的生长培养基缓慢稀释细胞。

4. 复苏培养基使用不当

解决方法：确保培养基使用前已经预热，并且尽快移除含有冷冻保护剂的培养基，防止活力下降。

5. 处理细胞时动作不够轻柔

解决方法：冻存和复苏过程对大多数细胞都会造成不利影响。不要通过涡旋振荡或者用力敲打培养瓶的方法使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外)，也不要高速离心细胞。

6. 细胞稀释过度

解决方法：将解冻后的细胞高密度接种，以改善复苏效果。

7. 冻存液中所用保护剂在储存过程中未避光

解决方法：如果未避光储存，冻存保护剂会转变为对细胞有毒性的物质；建议新取一只冻存保护剂，重新冻存细胞。

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